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BioLegend流式抗體選擇指南

 更新時間:2025-07-29    點(diǎn)擊量:16

 一、流式抗體核心選擇原則(快準(zhǔn)狠?。?/span>  

 1. 按樣本物種選克隆號  

物種

推薦抗體來源

明星克隆號舉例

小鼠抗人

CD3-UCHT1

小鼠

大鼠抗小鼠

CD4-GK1.5

大鼠

小鼠抗大鼠

CD45-OX1

> ? 避坑:勿用人源化抗體做小鼠實(shí)驗(yàn)(交叉反應(yīng)假陽性)  

 2. 按靶標(biāo)表達(dá)量選熒光染料  

image.png

 3. 按激光器選染料組合  

儀器配置

推薦方案

單激光(488nm

FITC + PE + PerCP

雙激光

FITC + PE-Cy7 + APC

四激光

BV421 + PE + APC + Spark NIR780

 

 二、流式抗體3步速選流程圖(收藏?。? 

image.png 

 三、流式抗體高頻問題解決方案  

 1. 信號弱/無信號  

- 對策:  

  1. 檢查抗體有效期(≤1年)  

  2. 增加抗體濃度(常規(guī)1:100 → 1:50)  

  3. 改用高亮度染料(如FITC→PE)  

 2. 背景噪音高  

- 對策:  

  1. Fc阻斷劑(BioLegend 422301)  

  2. 優(yōu)化破膜時間(胞內(nèi)染≤30min)  

  3. 設(shè)置FMO對照  

  3. 多色串?dāng)_嚴(yán)重  

- 對策:  

沖突組合

替代方案

FITC vs PE

改用PerCP

APC vs PE-Cy7

改用APC-Cy7

 

 

 四、萬能多色方案模板  

 4色基礎(chǔ)版(適合凋亡/周期分析)  

通道

靶標(biāo)

FITC

Annexin V

PE

CD4

PerCP

CD8

APC

PI/7-AAD

8色免疫分型版(適合T/B/NK分析)  

通道

靶標(biāo)

BV421

CD3

PE

CD4

APC

CD8

PE-Cy7

CD19

APC-Cy7

CD56

Spark NIR685

CD16

FITC

CD45

PerCP

HLA-DR

 五、流式抗體品牌選購建議  


需求

推薦品牌

明星產(chǎn)品線

高性價比

BioLegend

PureBlk™ 阻斷劑

超高靈敏度

BD Biosciences

Horizon™ 染料

稀有靶標(biāo)

Thermo Fisher

eBioscience™



BioLegendBD Biosciences、Thermo Fisher代理——天津益元利康生物科技有限公司,提供各種蛋白、細(xì)胞、菌株、抗體、試劑盒、耗材等,歡迎咨詢選購。

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